吲哚培養(yǎng)基屬于生化培養(yǎng)基,用于細(xì)菌靛基質(zhì)試驗(yàn),亦稱色氨酸肉湯(SN標(biāo)準(zhǔn))。培養(yǎng)基有天然、人工兩種吲哚培養(yǎng)基一般實(shí)驗(yàn)室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調(diào)pH至7.2~7.4,若pH值超過7.6或遠(yuǎn)低于6.8,則大多數(shù)細(xì)胞不能生長(zhǎng)。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。
由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì),因此一般培養(yǎng)基要防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長(zhǎng)時(shí)間的貯存,需要放在2~6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長(zhǎng)期保管,現(xiàn)在均改制成粉末。
1、干粉,買了后一定要保存在4度。有人保存在-20度我認(rèn)為沒有必要。但4度是非常必要的。保證期是有提示的。
2、配好的無血清培養(yǎng)基一定保存在4度,保存不要超過3個(gè)月。用時(shí)根據(jù)提示要加入谷胺酰胺。
3、加入血清的培養(yǎng)基,保存在4度不要超過1個(gè)月,從時(shí)間太長(zhǎng),活性下降。當(dāng)然稍微長(zhǎng)點(diǎn)也不一定出問題。但是根據(jù)細(xì)胞而定:如果原代培養(yǎng),藥新鮮,如果是腫瘤細(xì)胞,或僅維持傳代就不太要緊。但是原則是越新越好。