技術(shù)文章
Technical articles細胞名稱: | OPM-2 人多發(fā)性骨髓瘤細胞 | ||
產(chǎn)品貨號: | JSK550 | 規(guī)格: | T25瓶或者2ml凍存管 |
生長特性: | 懸浮生長 | 傳代比例: | 細胞80-90%匯合時 1:2~1:4傳代 |
培養(yǎng)條件: | 90% 1640,10%胎牛血清 ,100U/ml雙抗,37℃、5% CO2 | ||
凍存條件: | 70%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO |
僅供科研使用,不可用于臨床診斷和治療
凍存細胞接收后的處理:
1)干冰運輸,收到細胞后推薦直接復(fù)蘇,轉(zhuǎn)入液氮暫存可能導致細胞復(fù)蘇率降低;
2)收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已經(jīng)*揮發(fā)、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照后與我們聯(lián)系。
復(fù)蘇細胞接收后的處理:
1)收到細胞后,請首先檢查培養(yǎng)瓶是否破損或漏液,培養(yǎng)液是否混濁,如有漏液及培養(yǎng)液混濁情況請立即拍照把圖片發(fā)給我們。
2)75%酒精消毒瓶身后放培養(yǎng)箱中靜置4-6h后,在顯微鏡下確認細胞狀態(tài)并拍照100倍和200倍的照片。
3)鏡檢觀察細胞密度未達到80-90%時,將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,離心后棄去上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基。
4)如您收到細胞3天內(nèi)沒有反饋相關(guān)問題,出現(xiàn)的細胞問題將不提供免費重發(fā)服務(wù)。
注:發(fā)貨用培養(yǎng)基不可再次用來培養(yǎng)細胞
細胞培養(yǎng)方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①收集所有細胞懸液,1000rpm離心5min,小心棄去上清;
②用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶或者60MM培養(yǎng)皿中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存
①收集所有細胞懸液,1000rpm離心5min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
②將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。