人白介素Elisa試劑盒靈敏、高校、均勻、吸附性好、回收率高。用雙抗體夾心法測定人白細(xì)胞介素水平,純化后的人白細(xì)胞介素抗體用微孔板包被制成固體抗體。然后將抗體加入包被的單克隆抗體的微孔中,與HRP標(biāo)記的IL抗體結(jié)合形成抗體-抗原-酶-抗體復(fù)合物。清洗后,加入基質(zhì)TMB顯色。
一、使用方法:
1、試劑準(zhǔn)備:所有試劑都須在使用前達(dá)到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。實(shí)驗(yàn)操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2、加樣:加樣或試劑時(shí),請注意,取樣/標(biāo)準(zhǔn)品、酶復(fù)合物或底物時(shí),前孔與后孔加樣的時(shí)間間隔過大,會(huì)導(dǎo)致“孵育”時(shí)間不同,這將顯著影響測量值的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品和所有樣品)控制在10分鐘以內(nèi)。如果樣品較多,建議用多通道移液管加樣。
3、孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)應(yīng)將反應(yīng)板放在一個(gè)用濕布覆蓋的封閉箱內(nèi),并對酶板進(jìn)行覆蓋或涂膜,以防液體蒸發(fā);清洗后應(yīng)盡快進(jìn)行下一步操作,酶板應(yīng)隨時(shí)保持干燥同時(shí),嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
4、洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5、試劑配制:使用前,檢測A和檢測B應(yīng)離心幾次或幾次以下,然后再使用,使液體沉積在管壁或瓶蓋上,直至管底。標(biāo)準(zhǔn)品、供試品溶液的工作液a和工作液B應(yīng)按要求量使用,并用相應(yīng)的稀釋劑配制,不能混淆。請務(wù)必配置好標(biāo)準(zhǔn)液和工作液,盡量不要微量配置(如果檢測液a被吸收,一次不得少于10μl),以免稀釋不準(zhǔn)確造成濃度誤差;不要重復(fù)使用稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)液、工作液a或工作液B。
6、反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7、底物:底物請避光保存,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
二、使用注意事項(xiàng):
1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3、加樣的每一步都應(yīng)使用加樣裝置,并應(yīng)經(jīng)常檢查其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間應(yīng)控制在5分鐘以內(nèi)。如果樣品多,建議使用槍添加樣品。
4、每次測量時(shí)請同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,好做雙孔。如果待測物質(zhì)含量過高(樣品的OD值大于標(biāo)準(zhǔn)樣品孔一孔的OD值),請用樣品稀釋劑稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測量。計(jì)算時(shí),請乘以總稀釋倍數(shù)(× n× 5)。
5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6、底物請避光保存。
7、嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9、本試劑不同批號(hào)組分不得混用。